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Cell Biolabs:Cas13a蛋白ELISA檢測試劑盒

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2021-10-27     
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說起DNA編輯,你會想到CRISPR/Cas9,那RNA編輯呢?今天就帶大家認識一下RNA剪刀手CRISPR/Cas13a。

 

DNA編輯.jpg

 

2017年10月,張鋒實驗室首先證實CRISPR/Casl3a可靶向編輯哺乳動物體內(nèi)RNA。比起RNAi,Casl3a有著更強的特異性,并且由于其對哺乳動物細胞而言是非內(nèi)源性的,因此擾亂細胞中天然的轉(zhuǎn)錄后網(wǎng)絡的可能性極低。大家都知道,Cas9是利用tracrRNA和crRNA來實現(xiàn)與DNA目標的結(jié)合和切割。不過,Cas13a(也叫C2c2)只需要24個堿基的crRNA,它通過富含尿嘧啶的莖環(huán)結(jié)構(gòu)與Cas13a分子相互作用,并通過Cas13a的一系列構(gòu)象變化來促進RNA目標的切割。

RNA目標的切割.jpg

 

Cas13a是VI型CRISPR-Cas系統(tǒng)效應蛋白,具有RNA介導的RNA酶切活性能靶向并切割與crRNA互補的RNA,該編輯系統(tǒng)作為一種新興的治療和診斷工具,在病毒性疾病和癌癥等領域受到越來越多的關注。

 

如何快速有效的實現(xiàn)Cas13a蛋白的定量檢測,作為專業(yè)的生命科學醫(yī)藥原料供應商,Cell Biolabs中國區(qū)金牌代理,艾美為您推薦:Cas13a蛋白ELISA檢測試劑盒,實現(xiàn)Cas13a蛋白的定量檢測。

 

貨號PRB-5091
名稱Cas13a (CRISPR Associated Protein 13a, C2c2) ELISA Kit
Cas13a 蛋白ELSIA檢測試劑盒
檢測靈敏度沙氏纖毛菌的Cas13a蛋白檢測極限為31pg/mL
實驗原理本試劑盒用于測量各種細胞和組織裂解液樣本中沙氏纖毛菌的Cas13a蛋白的含量。試劑盒提供包被有抗Cas13a蛋白抗體的96孔板,在使用該試劑盒的測定中,樣品中的Cas13a蛋白牢固且穩(wěn)定地結(jié)合在孔上。然后加入生物素標記的Cas13a蛋白檢測抗體和顯色劑進行識別并顯色。Cas13a的比例與吸光度的強度成比例。Cas13a的絕對量可以通過與Cas13a標準品進行比較來量化。
說明書下載

 

Cas13a 蛋白ELSIA檢測試劑盒實驗結(jié)果:

Cas13a-1.png

圖1. Cas13a標準曲線

 

Cas13a-2.png

圖2. 純化的Cas13a重組蛋白。 泳道 1:SeeBlue Plus2 MW 標準品; 泳道2:重組Cas13a蛋白

 

重組的Cas13a蛋白的序列(下劃線部分是用來免疫生產(chǎn)試劑盒抗體的序列):

MGNLFGHKRWYEVRDKKDFKIKRKVKVKRNYDGNKYILNINENNNKEKIDNNKFIRKYINYKKNDNIL KEFTRKFHAGNILFKLKGKEGIIRIENNDDFLETEEVVLYIEAYGKSEKLKALGITKKKIIDEAIRQG ITKDDKKIEIKRQENEEEIEIDIRDEYTNKTLNDCSIILRIIENDELETKKSIYEIFKNINMSLYKII EKIIENETEKVFENRYYEEHLREKLLKDDKIDVILTNFMEIREKIKSNLEILGFVKFYLNVGGDKKKS KNKKMLVEKILNINVDLTVEDIADFVIKELEFWNITKRIEKVKKVNNEFLEKRRNRTYIKSYVLLDKH EKFKIERENKKDKIVKFFVENIKNNSIKEKIEKILAEFKIDELIKKLEKELKKGNCDTEIFGIFKKHY KVNFDSKKFSKKSDEEKELYKIIYRYLKGRIEKILVNEQKVRLKKMEKIEIEKILNESILSEKILKRV KQYTLEHIMYLGKLRHNDIDMTTVNTDDFSRLHAKEELDLELITFFASTNMELNKIFSRENINNDENI DFFGGDREKNYVLDKKILNSKIKIIRDLDFIDNKNNITNNFIRKFTKIGTNERNRILHAISKERDLQG TQDDYNKVINIIQNLKISDEEVSKALNLDVVFKDKKNIITKINDIKISEENNNDIKYLPSFSKVLPEI LNLYRNNPKNEPFDTIETEKIVLNALIYVNKELYKKLILEDDLEENESKNIFLQELKKTLGNIDEIDE NIIENYYKNAQISASKGNNKAIKKYQKKVIECYIGYLRKNYEELFDFSDFKMNIQEIKKQIKDINDNK TYERITVKTSDKTIVINDDFEYIISIFALLNSNAVINKIRNRFFATSVWLNTSEYQNIIDILDEIMQL NTLRNECITENWNLNLEEFIQKMKEIEKDFDDFKIQTKKEIFNNYYEDIKNNILTEFKDDINGCDVLE KKLEKIVIFDDETKFEIDKKSNILQDEQRKLSNINKKDLKKKVDQYIKDKDQEIKSKILCRIIFNSDF LKKYKKEIDNLIEDMESENENKFQEIYYPKERKNELYIYKKNLFLNIGNPNFDKIYGLISNDIKMADA KFLFNIDGKNIRKNKISEIDAILKNLNDKLNGYSKEYKEKYIKKLKENDDFFAKNIQNKNYKSFEKDY NRVSEYKKIRDLVEFNYLNKIESYLIDINWKLAIQMARFERDMHYIVNGLRELGIIKLSGYNTGISRA YPKRNGSDGFYTTTAYYKFFDEESYKKFEKICYGFGIDLSENSEINKPENESIRNYISHFYIVRNPFA DYSIAEQIDRVSNLLSYSTRYNNSTYASVFEVFKKDVNLDYDELKKKFKLIGNNDILERLMKPKKVSV LELESYNSDYIKNLIIELLTKIENTNDTL

 

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